praktikum mikrobiologi pembuatan media

Laporan Praktikum Mikrobiologi

PEMBUATAN MEDIA

OLEH:

                                     Nama            : Sakirin Manik

                                     Nim               : 1305105010029

                                     Kelompok     : III (tiga)

                                     Kelas             : Selasa (12.00-13.45)

Mengetahui,                                                              Darussalam, Oktober 19, 2014

asisten:                                                                  Praktikan

(           )                                                             (Sakirin Manik)

I. PENDAHULUAN

1.1. Latar Belakang

Media adalah suatu subtrak dimana mikroorganisme dapat tumbuh yang disesuaikan dengan lingkungan hidupnya. Media pertumbuhan mikroorganisme adalah suatubahan yang terdiri atas campuran nutrisi yang diperlukan mikroorganisme untuk pertumbuhannya. Mikroorganisme memanfaatkan nutrisi medi berupa molekul-molekul kecil yang  dirakit untuk menyusun komponen sel. Media kultur berdasarkan konsistensinya dibedakan menjadi tiga macam, yaitu media cair (liquid medium), media semi padat (semi solid medium), dan media padat (solid medium). Sedangkan media berdasarkan komposisi atau susunan bahannya yaitu media sintesis, media non sintesis, dan media semi sintesis.

1.2. Tujuan

Untuk mempelajari jenis-jenis media untuk pertumbuhan mikroorganisme serta mempraktekkan pembuatan media.

1.3. Waktu dan Tempat

               Praktikum ini dilaksanakan pada hari Selasa,14 Oktober2014 bertempat di Laboratorium Mikrobiologi jurusan Teknologi Hasil Pertanian Fakultas Pertanian Universitas Syiah Kuala.

II. TINJAUAN PUSTAKA

            Media biakan adalah media steril yang digunakan untuk menumbuhkan mikroorganisme dengan memberikan tempat dan kondisi yang mendukung untuk pertumbuhan mikroorganisme tersebut. Media biakan terdiri dari garam organik, sumber energi (karbon), vitamin dan zat pengatur tumbuh (ZPT).  Selain itu, dapat pula ditambahkan komponen lain seperti senyawa organik dan senyawa kompleks lainnya (Soeryowinoto 1985).

Unsur karbon yang digunakan oleh mikroorganisme dapat berupa pancaran atau cahaya yang disebutfototrof dan jenis kemototrof yang menggunakan hasil oksidasi senyawa-senyawa kimia dalam media untuk memperoleh energinya. Vitamin dalam media biakan berfungsi membentuk substansi yang mengaktivasi enzim.  Mikroorganisme memperlihatkan gejala yang berlainan dalam pola pengambilan nutrisi.  Meskipun semua mikroorganisme membutuhkan vitamin dalam proses metaboliknya, ada beberapa jenis mikroorganisme yang mampu mensintesis kebutuhan vitaminnya sendiri dari senyawa-senyawa lain di dalam medium. Zat pengatur tumbuh pada tanaman adalah senyawa organik bukan hara dalam jumlah sedikit tetapi dapat mendukung, menghambat dan merubah proses fisiologi tumbuhan.  Zat tersebut sangat diperlukan sebagai komponen medium bagi pertumbuhan dan diferensiasi. Tanpa penambahan zat pengatur tumbuh dalam medium, pertumbuhan mikroorganisme sangat terhambat bahkan mungkin tidak dapat tumbuh sama sekali (Hadioetomo, dkk. 1986).

Berdasarkan komposisi nutrisinya, media terbagi menjadi tiga macam yaitu media alam, media semi sintetik dan media sintetik. Komposisi media alam tidak dapat diketahui dengan pasti setiap waktu karena dapat berubah-ubah dalam bahan yang digunakan dan bergantung pada asalnya, misalnya jagung, kentang, serangga dan rambut. Media semi sintetik terdiri dari campuran antara bahan alami dengan bahan kimia yang komposisinya dapat diketahui secara pasti, misalnya  Potato Dextrose Agar (PDA). Media sintetik terbuat dari bahan kimia yang komposisi dan konsentrasinya dapat diketahui dengan pasti, misalnya Czapek’s Agar (Gunawan dkk. 2006).

Saat ini media agar merupakan media yang sangat umum digunakan dalam penelitian-penelitian mikrobiologi. Media agar ini memungkinkan untuk dilakukannya isolasi bakteri dari suatu sampel, karakterisasi morfologi, sampai penghitungaan bakteri yang dikenal dengan nama total plate count. Bentuk koloni bakteri dan warna-warninya mudah sekali dikenali dengan media ini dengan cara mengubah komposisi nutrien atau menambahkan indikator. Komposisi media bakteri dapat dimodifikasi sehingga dapat digolongkan menjadi media umum, media selektif (bakteri tertentu saja yang dapat tumbuh) dan media diferensial (bakteri tumbuh dengan memberikan ciri-ciri tertentu) (Achmad, 2007).

III. METODOLOGI

3.1. Alat dan Bahan

Alat dan bahan yang digunakan pada praktikum ini yaitu kentang 200 g, glukosa 20 g, agar 15 g, aquades 1 liter, ekstrak daging 3g, dan pepton 5 g, timbangan, tabung reaksi, petridish, dan autoklaf.

3.2. Skema Kerja

Pembuatan media Potato DextroAgar (PDA)

 

  

 

Aqudes 1 liter

Direbus hingga lunak

                                                                                                                          

 

 

diamati

Disetrilkan di autoklaf

Didistribusikan kedalam tabung reksi 5 ml, jika ingin dibuat agar miring

Disimpan pada suhu kamar

Dibiarkan hingga padat

Dituang kedalam petidish sebanyak 15-20 ml

didinginkan sampai suhu 45ºC

Campuran disterilkan pada suhu 121 ºC selama  15 menit

Larutan pengencer

pH diatur

Aquades 1 liter, glukosa, agar-agar

Ekstrak kentang dipanaskan

                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                  

Pembuatan Media Nutrien Agar (NA)

diamati

Disetrilkan di autoklaf

Didistribusikan kedalam tabung reksi 5 ml, jika ingin dibuat agar miring

Disimpan pada suhu kamar

Dibiarka hingga padat

Dituang kedalam petridishsebanyak 15-20 ml

Didinginkan sampai suhu 45 ºC

Campuran disterilkan pada suhu 121 ºCselama 15 menit

Larutan pengencer

pH diatur

aquades

Dilarutkan

                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                         

IV. PEMBAHASAN

            Media diferensial mac conkey  berguna untuk  membedakan bakteri yang memecah laktosa (koloni merah muda) dengan bakteri yangtidak memecah laktosa (koloni tidak berwarna). EMB Agar (Eosine Metylene Blue Agar)  

Digunakan dalam diteksi dan isolasi bakteri patogen golongan enterobacteriaceae. Laktosa dan sukrosa yang terkandung dalam medium ini membiarkan laktosa dan sukrosa negatif dari shalmonellae dan shigellae untuk dibedakan dari laktosa positif organisme coliform dan sukrosa positif, jenis flora ( sepertiProteus vulgaris, Citrobacter, Aeromonashydrophilla). Pertumbuhan mikroorganisme yang tidak diinginkan dan khususnya bakteri gram positif, dihambat oleh adanya zat warna yang ada dalam media ini (Ermila, 2005).

               Beberapa jenis media yaitu deMann Rogosa Sharpe Agar (MRSA) bakteri yang tumbuh pada media ini adalah lactobacillus. Media APDA mikroorganisme yang tumbuh adalah khamir. Enterobactericae tumbuh pada media Violet Ret Bile Agar (VRBA). Media PGYA untukpertumbuhan khamir. Media EMBA (Esin Meythylene Blue Agar) bakteri yang tumbuh p aerugenosa. Media Mannitol Salt Agar (MSA) untuk identifikasi staphylococcus aureus. Sedangkan media Bismut Sulfit Agar (BSA) untuk pertumbuhan salmonella sp.

               Yang membedakan antara media padat dengan media cair berdasarkan komposisi penyusunnya yaitu pada media cair tidak terdapat bahan pemadat pada media tesebut. Sedangkan pada media padat, disana terdapat bahan pemadat seperti milum, gelatin, selulosa, dan agar-agar. Bahan-bahan pemadat itulah yang membedakan antara media padat dengan media cair.

               Tidak semua mikroorganisme dapat tumbuh pada media selektif karena pada media ini hanya digunakan untuk menyeleksi pertumbuhan mikroba yangdiperlukan dari campuran mikroba-mikroba lain yang terdapat dalm bahan yang  akan diperiksa. Dengan penambahan zat-zat tertentu mikroba yang dicari dapat dipisahkan dengan mudah.

Media selektif (selective medium) atau  media penghambat adalah suatu media yang ditambah zat kimia tertentu yang bersifat selektif untuk mencegah pertumbuhan mikroorganisme lain sehingga dapat mengisolasi mikroorganisme tertentu, dalam pengaplikasiannya media selektif digunakan agar didapatkan mikroorganisme yang diinginkan atau yang dibutuhkan si peneliti, misalnya media yang mengandung kristal violet pada kadar tertentu, yang dapat mencegah pertumbuhan bakteri gram positif tanpa mempengaruhi bakteri gram negatif. Media ini selain mengandung nutrisi juga ditambah suatu zat tertentu sehingga media tersebut dapat menekan pertumbuhan mikroorganisme lain dan merangsang pertumbuhan mikroorganisme yang diinginkan. Contoh media selektif yaitu Mannitol Salt Agar (MSA) untuk identifikasi staphylococcus aureus, medi buffered ekstrak ragi arang agar-agar bakteri yang rumbuh pada media ini adalah legionella pneumophila, dan media Xylose Lysine Deoxycholate (XLD) bakteri yang tumbuh yaitu salmonella sp dan shigella sp.

V. PENUTUP

5.1. Kesimpulan

              

 Adapun kesimpulan yang didapatkan dari praktikum Pembuatan Media adalah sebagai berikut:

1. Tidak semua mikroorganisme dapat tumbuh pada media yang sama.

2. Kapang dapat tumbuh dengan baik pada media agar kentang (PDA).

3. Pada media cair tidak mengandung bahan pemadat

4.  Alat yang digunakan pada pembuatan media harus steril

5. Salmonella sp dapat tumbuh pada media Xylose Lysine Deoxycholate (XLD)

5.2. Saran

            Sebelum melakukan praktikum, asisten lab harus menyiapkan terlebih dahulu perlengkapan praktikum, supaya praktikan tidak disuruh keluar meninggalkan laboratorium walaupun sebentar untuk mengambil bahan.

                       

DAFTR PPUSTAKA

Achmad. 1999. Media PertumbuhanMikroba. Gramedia. Jakarta

Gunawan,dkk. 2006.Mikrobiologi. IPB Press. Bogor

Hadioetomo, dkk. 1986. Dasar-dasar Mikrobiologi. UI Press. Jakarta

Soeryowinoto. 1985. Budidaya Jaringan dan Manfaatnya. UMM Press. Malang